差速離心分離法與分離效果
2009-05-21
[1883]
差速離心比較簡(jiǎn)單,離心過(guò)程中將懸混液分離成沉淀與上清液兩部分,通過(guò)倒出上清液或刮出沉淀,除去較小或較大的顆粒雜質(zhì),達(dá)到分離提取的目的。該方法多使用角轉(zhuǎn)子,離心分離的時(shí)間短,低速一般不超過(guò)0.5h,高速不超過(guò)3~4h。離心計(jì)算設(shè)計(jì)方便,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好。
差速離心分辨能力較差,一般不能獲得理想純度,沉淀不能達(dá)回收。
對(duì)于有活性料,需要認(rèn)真選擇RCF與離心時(shí)間,否則受過(guò)大離心力的壓力作用,有些顆粒受擠壓而變形甚至破裂失去活性。生物顆粒表面由于一些大分子等以三級(jí)結(jié)構(gòu)相互接觸,緊緊擠壓在一起,形成不可逆的氫鍵結(jié)合、粘黏,使原有活性消失或減退,形成廢品餅子,所以形成沉淀的離心力絕不是越大越好。
差速離心中樣品的產(chǎn)率與純度是矛盾的,要求純度高、產(chǎn)率就會(huì)低。
顆粒大小和密度對(duì)沉降的影響。溶劑介質(zhì)中顆粒沉降速度由r2p (ρp-ρm)決定。影響沉降的因素是顆粒大小與溶劑介質(zhì)的密度。例如密度ρ大的小顆??赡芘c密度ρ小的大顆粒有相似的S值。對(duì)這類(lèi)顆粒就還要用密度梯度法進(jìn)一步分離提純化。